PCA Test na celkový počet E. coli a koliformních bakterií

Testovací sklíčko na E. coli obsahuje dva testy – jeden na každé straně. Jedna strana slouží ke stanovení celkového počtu mikroorganismů, což vám poskytne přehled o celkové mikrobiologické čistotě vzorku. Druhá strana je určena k detekci koliformních bakterií. Pokud kolonie na této straně pod UV světlem fluoreskují, lze je s vysokou pravděpodobností identifikovat jako E. coli (podrobnosti o naší UV lampě naleznete níže na této stránce).

Pokud testovaný vzorek obsahuje mikrobiologickou kontaminaci, narostou na sklíčku kolonie. Hladinu mikrobiální kontaminace ve vzorku vyhodnotíte porovnáním hustoty narostlých kolonií s přiloženou srovnávací tabulkou.

Tato ponorná sklíčka (dipslides) se dodávají v balení po 10 kusech. Sklíčko má flexibilní nosič agaru a je uloženo v odolném, nerozbitném pouzdře.

Pro dosažení přesných výsledků budete potřebovat dlouhovlnnou UV lampu s vlnovou délkou 366 nm. Naše testovací sada na E. coli vhodnou UV lampu již obsahuje: Ecoli Test Kit. UV lampu si můžete zakoupit také samostatně zde: UV lampa.

Návod k použití ponorných sklíček k detekci E. coli

Testování kapalných vzorků

1. Vyjměte ponorné sklíčko z pouzdra. Dbejte na to, abyste se nedotkli agarového povrchu.

2. Ponořte sklíčko do vzorku přibližně na 10 sekund.

3. Nechte přebytečnou kapalinu ze sklíčka odkapat.

4. Vložte sklíčko zpět do pouzdra a pevně jej uzavřete.

5. Pouzdro označte pomocí přiložených štítků.

6. Umístěte sklíčko do inkubátoru na 24–48 hodin při teplotě 35 °C.

7. Po inkubaci porovnejte hustotu kolonií na sklíčku s přiloženou tabulkou:

   • Žlutá/slámová strana (celkový počet mikroorganismů): ukazuje celkový počet životaschopných organismů ve vzorku.

   • Červená strana (agar MacConkey č. 3): stanovuje přítomnost koliformních bakterií (koliformní bakterie tvoří červené až růžové kolonie).

8. Pro ověření přítomnosti E. coli zkontrolujte stranu s agarem MacConkey č. 3 pod UV lampou. Pro lepší viditelnost fluorescence provádějte odečet v zatemněné místnosti.

9. Hodnocení:

   • Červené/růžové kolonie, které pod UV světlem fluoreskují, představují pozitivní nález pro E. coli.

   • Kolonie, které nefluoreskují, znamenají negativní výsledek na E. coli.

   • Kolonie, které pod UV světlem sice fluoreskují, ale nemají červenou/růžovou barvu, se rovněž hodnotí jako negativní výsledek pro E. coli.

Stěrové testování povrchů

1. Vyjměte ponorné sklíčko z pouzdra. Dbejte na to, abyste se nedotkli agarového povrchu.

2. Uchopte pružný konec nosiče a přitlačte jednu stranu sklíčka k testovanému povrchu. Jemným tlakem zajistěte rovnoměrný kontakt celé plochy agaru s povrchem.

3. Postup opakujte s druhou stranou sklíčka na sousedním místě testovaného povrchu.

4. Vložte sklíčko zpět do pouzdra a pevně jej uzavřete.

5. Pouzdro označte pomocí přiložených štítků.

6. Umístěte sklíčko do inkubátoru na 24–48 hodin při teplotě 35 °C.

7. Po inkubaci porovnejte hustotu kolonií na sklíčku s přiloženou tabulkou (slámově zbarvená strana = celkový počet organismů, červená strana MacConkey č. 3 = koliformní bakterie).

8. Pro ověření přítomnosti E. coli zkontrolujte stranu s agarem MacConkey č. 3 pod UV lampou v zatemněné místnosti.

9. Červené/růžové kolonie fluoreskující pod UV světlem značí pozitivní nález pro E. coli; nefluoreskující nebo jinak zbarvené kolonie značí negativní výsledek.